食品安全國家标準
1、稀釋度的(de)選擇
液體樣品可(kě)直接取原液進行檢驗；固體或者半固體則必須依據檢驗經驗，選取2-3個适宜稀釋度進行檢驗（一般樣品選取1:10,1:100,1:1000三個稀釋度進行檢驗。若遇到不常做(zuò)的(de)樣品，可(kě)适當延長稀釋度至1：10000甚至更大(dà)）。
2、空白實驗
分(fēn)别吸取1mL滅菌生理(lǐ)鹽水(shuǐ)到平皿中做(zuò)空白對照(zhào)，若空白有菌落生長則該實驗無效。
3、培養基的(de)傾注
根據對樣品污染情況的(de)估計，若樣品有表面蔓延生長的(de)可(kě)能性，則待第一次傾注的(de)瓊脂凝固後，可(kě)在表面再覆蓋一層瓊脂以避免菌落蔓延而難以計數。
4、菌落總數的(de)計算(suàn)
本标準的(de)難點在于菌落計數及計算(suàn)。
1）菌落計數時，從低稀釋度的(de)平闆開始計數。若所有平闆上的(de)菌落數均小于30CFU，則需計數所有平闆上的(de)菌落數，但僅采用(yòng)最接近30CFU的(de)兩個平闆的(de)菌落數來計算(suàn)最終菌落數。
以固體樣品爲例，菌落數選取、計算(suàn)過程及結果修約如下(xià)：
2）當第一稀釋梯度一個闆上菌落數高(gāo)于30，另一個低于30，則依據标準應當以介于30-300之間的(de)菌落數作爲該稀釋梯度的(de)菌落數。
以固體樣品爲例，菌落數選取、計算(suàn)過程及結果修約如下(xià)：
3）若所有平闆上的(de)菌落數均大(dà)于30CFU，則隻計數30-300CFU之間的(de)平闆上的(de)菌落數，并采用(yòng)這些數據，依據标準中給出的(de)公式，進行最終菌落總數的(de)計算(suàn)，此時将大(dà)于300CFU的(de)記爲“多(duō)不可(kě)計”，以TNTC表示。
以固體樣品爲例，菌落數選取、計算(suàn)過程及結果修約如下(xià)：
4）若所有稀釋度的(de)平均菌落數都大(dà)于300，則不能所有都記爲TNTC，必須将最高(gāo)稀釋度的(de)兩個平闆上的(de)菌落數逐一的(de)計數，再計算(suàn)平均數，該平均數爲該梯度的(de)菌落總數，其餘平闆上的(de)菌落數可(kě)記爲TNTC。
